Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1M-糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次用到肾脏自身突变到用到1DF高血压诊疗病症的成果部将在幼儿时期就有更好的所述，多个肾脏自身突变白血病的幼儿之前有70%在血浆切换后10年内罹患高血压，而随访15年的幼儿这一百分比增高到84%。相较之下，占诊疗1DF高血压一半以上的DF1DF高血压的复发机制还无法得到必要的学术研究。

越来越多的人开始用于分期系统来度量1DF高血压的成果：个躯在用到多种肾脏自身突变时转至第1过渡阶段，用到血糖异常时转至第2过渡阶段，用到病症时转至第3过渡阶段。一些多发肾脏自身突变白血病的个躯，在1期和2期，成果较很慢，并发展为复发的1DF高血压。我们之前所述了一四组在首次样品到多种肾脏自身突变抽取后最少10年无高血压的极很慢成果者，这四组患儿000人少，但特征非常明确。随后，我们发现肾脏自身免疫选择性CD8+T细胞膜催化在成果减很慢的患儿之前基本不不存在，但在早先复发和长时间不存在的高血压患儿之前很容易样品到。这有可能表明，与成果患儿相较，这些患儿自身炎症的调节增强。

早期学术研究表明，尽管调节性T细胞膜(Treg)数量正常，但高血压患儿不存在一些系统缺陷，其之前之外对IL-2的催化战斗能力减低。此外，高血压患儿之前的现像CD4+T细胞膜有可能对调节更具抵抗性，平庸为现像T细胞膜的抑止减弱，其本质导致的Treg和躯外导致的诱发Treg，以及免疫经历的CD4+T细胞膜之前IL-2催化减弱。本学术研究的目的是所述了CD4+调节性T细胞膜(Treg)在一小群极减很慢成果者之前的特征，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访小时为18-32年。

方法有：BOX学术研究是一项以人群为基础的侧向学术研究，在21岁下述患病的患儿亲属之前核对1DF高血压的小心因素。我们之前所述了长时间减很慢成果者的特征，他们始终保持多重肾脏自身突变白血病超过10年，但无法用到高血压的诊疗病症，很慢性或非同步神经性自身免疫。随后，10名此后始终保持无高血压并愿意提供大量肾脏抽取的减很慢成果者扩展到T和B细胞膜系统分析。在迄今为止的学术研究之前，8名很慢成果者(SP四组)，之前位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的肾脏自身突变白血病。所有的发起者都处于1DF高血压成果的1期，尽管一些人随后失去了肾脏自身突变对某些免疫的白血病催化，然而，一名患儿已经处于2期最少6年，但无法用到诊疗病症，一名患儿被治疗为高血压，该受试者72岁，在采集实验抽取时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据处理之前对该供躯同步进行了原则上评估。分开外周血单个核细胞膜(PBMCs)，采用多实例流式细胞膜术和T细胞膜抑止试验评估供躯之前Treg的频部将、表DF和系统。用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、表征和转回)同步进行无行政官员聚类分析，评估Treg表DF。

结果：与保健供躯相较，来自很慢成果躯的梦境CD4+T细胞膜的行政官员聚类标示成，激光阴的梦境CD4+ Treg频部将增高，与糖皮质激素诱发的TNFR具体细胞内(GITR)表达成来增高有关。一名HbA1c升高的患儿与成果减很慢者和反之亦然的对照四组相较，Treg谱有所不同。系统最近，与保健供躯相较，来自减很慢成果躯的Treg选择性的CD4+现像T细胞膜抑止明显受损。平庸为对现像CD4+T细胞膜CD25和CD134表达成来的抑止增高。

所示1 深入的表DF分析标示成，CD4+Treg亚DF在很慢成果链表之前增高。由FlowSOM生成的Treg楼内，聚集地在来自所有供躯的光阴CD4+CD45RA -细胞膜上。根据上标物表达成来鉴定成10个元簇:梦境T细胞膜_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;梦境T cell_4;CD49b梦境T细胞膜;HLA-DR + GITR +梦境T细胞膜;闪存Treg_1;闪存Treg_2;闪存Treg_3;和闪存Treg_4。(a)用于9个不同Treg上标生成的10个元簇的MST。每个数据流代表者一个战斗群(100个战斗群)，大得多的元战斗群(10个元战斗群)在数据流四组远处上色。每个数据流之前的面包所示指出单个上标的表达成来最高级别。(b)每个元聚类的热所示，以标示成主躯上标表达成来。(c, d)为HD四组(c)和SP四组(d)生成所示，以及FlowSOM辨认的每个元簇的表层。(e-l)正因如此轻元素为每个metacluster木箱线或所示(轻元素> 0.05%)确定为HD和SP四组:闪存Treg_2 (e),闪存Treg_3 (f),闪存Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +梦境T细胞膜(h)、梦境T cell_1(i),梦境T cell_2 (j),梦境T cell_3 (k) n d CD49b梦境T细胞膜(l)。绿色左上角代表者理应SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对小写秩核查。此键适用于所示形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

所示2 用于CITRUS的预测模DF猜测，Treg频部将的增高是成果减很慢的logo。分级依赖型(a - f)和柑橘分析(g-k)相比较SP发起者和反之亦然的HD发起者在CD4+CD45RA−T细胞膜上的差别。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群躯的代表者性所示。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3掺入，然后通过HLA-DR和GITR表达成来同步进行分开，模拟FlowSOM群躯。(b) HD(黑点)和SP(黑斑)四组以及供躯SP 606(绿色)之前CD25+ cd127的频部将汇总所示。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+依赖型三邻域的木箱线或所示;(c) HLA-DRloGITR−(闪存Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(闪存Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(闪存Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+闪存T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表达成来强度著色，标记突成的簇被辨认为SP和HD链表之间的不同。(j)木箱线或所示标示成了在SP(黑斑)和HD(灰点)四组之前，CITRUS梦境Treg_3和Treg_4的正因如此轻元素(百分比)。(k)直方所示标示成每个簇的表DF(粉红色)和Treg上标正因如此表达成来与历史背景表达成来(浅蓝色);上列，闪存Treg_3;示意所示一行，闪存Treg_4。历史背景与所有其他簇之前上标的表达成来有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对小写秩核查

所示3 与保健献血者相较，成果减很慢者梦境treg的GITR增高。每个梦境CD4+T细胞膜元簇(梦境T细胞膜_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;CD49b +梦境T细胞膜;HLA-DR + GITR +梦境T细胞膜;闪存Treg_2;闪存Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)样品每个表达成来上标的巨大变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)链表的表达成来热所示(sp606不之外在内)。(c,d)梦境Treg_4元簇之前所有HD(黄褐色)、所有SP(浅蓝色)和SP 606(绿色)的FlowSOM GITR表达成来接在，标示成直方所示(c)和汇总所示(d)。Wilcoxon配对小写秩和核查，p< 0.07(绿色)所有供躯之外，p< 0.05(浅蓝色)供躯SP 606和反之亦然的HD不之外在测试之前。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs之前GITR表达成来，从分级依赖型，从所有HD(黄褐色)、所有SP(浅蓝色)和SP 606(绿色)接在，标示成直方所示(e)和汇总所示(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对小写秩核查

所示4 来自减很慢成果的CD4+ treg细胞膜操纵现像CD4+T细胞膜的战斗能力减低。SP四组用浅蓝色的线或和左上角指出，HD四组用黑色的线或和左上角指出，绿色的线或/左上角指出供躯sp606。用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜同步进行分选。CD4+CD25−(接收者者)被上标为CFSE, Treg按判读的百分比高锰酸钾。用抗CD3 /28微珠光阴化细胞膜，培训3翌日同步进行流式细胞膜术样品。(a-d)与CD4+接收者者正因如此应的treg培训(自躯)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD接收者者培训。(a,b,f) CFSE凋亡(a,e)和CFSE抑止多于(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑止多于。用于白血病对照(激光阴的响应细胞膜不含treg)计算抑止多于。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相比较测试

所示5 现像CD4+T细胞膜对减很慢成果的T细胞膜光阴化的抑止更敏感性。SP四组用浅蓝色的线或和左上角指出，HD四组用黑色的线或和左上角指出，绿色的线或/左上角指出供躯sp606。用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜同步进行分选。CD4+CD25−(接收者者)被cfsel上标，treg按判读的百分比高锰酸钾。用抗CD3 /28微珠光阴化细胞膜，培训3翌日同步进行流式细胞膜术(CD25反染)和细胞膜因三子分析。HD Treg与HD、SP或sp606接收者者一同培训。(a,b) CFSE凋亡(a)和CFSE抑止百分部将(b)。(c,d) CD25抑止百分部将(c)和CD134抑止百分部将(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培训之前的表达成来。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相比较测试

假设：我们得成的假设是，来自减很慢成果三子的光阴化梦境CD4+Treg在GITR表达成来之前得到了扩展和多样，强调了更进一步学术研究Treg在1DF高血压几率个躯之前的系统性的必要性。

原文成处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28